質粒DNA構建的酶切目的、原理、器材、試劑、實驗準備

時間：2020-01-05

作者：杭州廣旭地坪工程有限公司

詞條
詞條說明
提取染色體DNA和質粒DNA的方法
一、質粒構建原理在堿性條件下，染色體DNA和質粒DNA都發生變性，但質粒DNA的**螺旋共價閉合環狀結構的兩條互補鏈不會*分離，當用酸性的高鹽緩沖液將pH中和至中性時，變性的質粒DNA又恢復到原來的構型并溶解在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構。通過離心，纏結的染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質—SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。上清液中的質粒DNA因不溶于70％的乙
祝夢想成真：園藝的同學即將要開始一段全新的追夢旅程
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質粒DNA構建的酶切目的、原理、器材、試劑、實驗準備
II型限制性內切酶能識別雙鏈質粒構建DNA內部的特殊序列并在識別位點處將雙鏈切斷，形成粘性末端或齊平末端，通過電泳酶切后的DNA混合物能夠確認和分離酶切片段。 1．目的學會用限制性內切酶切割質粒DNA。 2．原理 II型限制性內切酶能識別雙鏈DNA內部的特殊序列并在識別位點處將雙鏈切斷，形成粘性末端或齊平末端，通過電泳酶切后的DNA混合物能夠確認和分離酶切片段。 3．器材旋渦混合器，微量移液
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